手机看片日韩国产一区二区-手机看片日韩日韩国产在线看-手机看片日韩日韩韩-手机看片亚洲-久草97-久草a在线

咨詢熱線

400-028-6680

當(dāng)前位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章  >  臺(tái)式低速冷凍離心機(jī)提取細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核蛋白離心詳細(xì)步驟

臺(tái)式低速冷凍離心機(jī)提取細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核蛋白離心詳細(xì)步驟

更新時(shí)間:2021-09-08      點(diǎn)擊次數(shù):2768
   臺(tái)式低速冷凍離心機(jī),轉(zhuǎn)速一般不超過4000r/min,最大容量為2~4L,是實(shí)驗(yàn)室于大量初級(jí)分離提取生物大分子、沉淀物等。其轉(zhuǎn)頭多用鋁合金制的甩平式和角式兩種,離心管有硬質(zhì)玻璃、聚乙烯硬塑料和不銹鋼管多種型號(hào)。離心機(jī)裝配有驅(qū)動(dòng)電機(jī)、定時(shí)器、調(diào)整器(速度指示)和制冷系統(tǒng)(溫度可調(diào)范圍為-20~+40℃),可根據(jù)離心物質(zhì)所需,更換不同容量和不同型號(hào)轉(zhuǎn)速的轉(zhuǎn)頭。
  臺(tái)式低速冷凍離心機(jī)提取細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核蛋白離心詳細(xì)步驟:
  1.決定細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)應(yīng)該是80%或者更好:
  2.用離心機(jī)以1500r/min離心5min
  3.棄上清液,用等體積的冷PBS洗細(xì)胞,像步驟2那樣,反復(fù)3次
  4.根據(jù)估計(jì)的沉淀量加入5倍體積的isotoniclysisbuffer到細(xì)胞顆粒中,使細(xì)胞溫和懸浮,盡量避免泡沫
  5.加入裂解液lysisbuffer在懸浮的細(xì)胞中,并放在冰上15min讓細(xì)胞膨脹,可以通過顯微鏡檢查
  6.對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中膨脹的細(xì)胞,加入10%的IGEPALCA-630使最后的濃度達(dá)到0.3%,混勻,加的時(shí)候要溫和
  7.立即離心(量大的可以用1.5ml的EP管,以5500r/min離心30s;量大的可以用50ml的管子以5500r/min離心2min)
  8.轉(zhuǎn)移上清液(細(xì)胞質(zhì)蛋白)到一個(gè)新的冷凍管中
  9.用懸浮顆粒5倍體積的isotoniclysisbuffer懸浮細(xì)胞,并混勻
  10.用離心機(jī)離心細(xì)胞懸浮液,以1500r/min離心5min,移掉上清液
  11.用2/3倍體積的extractionbuffer懸浮顆粒
  12.把管子放置在震蕩混勻器上,以700r/min,15min震蕩混勻,接著以1400r/min,15min,整個(gè)過程要仔細(xì),避免泡沫產(chǎn)生
  13.以9400r/min離心15min,低溫離心完后轉(zhuǎn)移上清液到一個(gè)新的冷凍離心管中
  14.分成幾份用液氮冷凍,并且保存起來(lái)(長(zhǎng)期保存應(yīng)放在-80℃上,短期保存要放在-20℃上)

聯(lián)系我們

四川蜀科儀器有限公司 公司地址:四川省成都市溫江區(qū)海旺路99號(hào)5號(hào)樓   技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)
  • 聯(lián)系人:曾先生
  • QQ:599353114
  • 公司傳真:028-61985396
  • 郵箱:522879268@qq.com

掃一掃 更多精彩

微信二維碼

主站蜘蛛池模板: 欧美成人久久久| 日本二本道| 亚洲欧美一区在线| 欧美一级片免费在线观看| 人人添人人澡人人澡人人人爽| 手机在线一区二区三区| 亚洲痴女| 欧美成人国产一区二区| 一级录像免费录像| 欧美激情一区二区三区蜜桃视频| 性色a| 欧美成人精品一区二区| 婷婷久久综合九色综合98| 欧美日韩一区二区三区麻豆| 欧美国产视频| 日韩特级毛片| 欧美国产成人在线| 日本aaa视频| 日韩欧美区| 日韩免费小视频| 色综合91久久精品中文字幕| 亚洲娇小性hd| 日本a级片网站| 区二区三区四区免费视频| 色视频综合| 日韩字幕一中文在线综合| 日本黄视色视频在线观看| 日本aaaa级| 欧美性video精品| 香港三级欧美国产精品| 亚洲一级免费视频| 天天影视色香欲综合网 寡妇 | 人人舔人人爱| 日本精品视频在线观看| 亚洲视频中文字幕在线| 亚洲一区二区中文字幕| 欧美国产综合日韩一区二区| 日韩免费高清视频网站| 日韩丝袜亚洲国产欧美一区| 欧美亚洲国产成人高清在线| 人人揉人人添人人捏人人看|